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ポリクローナル抗体・モノクローナル抗体の受託作製ならティー・ケー・クラフト。 抗体精製・標識、抗原カラム作製、腹水作製、細胞培養、各種動物血清も扱っております。 |
 受託・製品サービス ポリクローナル抗体作製 モノクローナル抗体作製 ペプチド合成 抗体精製 抗体標識 抗原カラム作製 腹水作製 細胞培養 動物血清等製品 試薬製品 実験／測定系開発補助 Q & A 会社概要 お問い合わせ Ｃｏｌｕｍｎ Ｌｉｎｋ Site Map |
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| ご依頼 | モノクローナル抗体作製において、免疫、アッセイに必要な量の抗原をご提供いただきます。通常、抗原１種類につき、マウス５匹、またはラット３匹に免疫を行います。抗原の形状につきましては、粉末、液体、PAGE Gel等、どの様な形状でも可能ですが、アッセイ用抗原は出来るだけ水溶性の抗原をお願いしております。お客様からのご依頼を確認した後、モノクローナル抗体作製の計画書をお送り致します。 ※ 抗原量についてはこちら |
| Section 1 （約２ヶ月半） |
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| 免疫開始 | 免疫予定の動物は、入荷後約１週間の予備飼育を行った後、正常血清（血清約50 uL）を採血します。その後、フロイント・アジュバントと等量混合した抗原を、皮内、数ヶ所〜十数ヶ所に免疫いたします。この操作を、約２週間間隔で計４回行います。 |
| 試採血・ELISA | 計４回の免疫後、７日目に試採血（血液約50 uL）を行います。その後、ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) により力価を測定し、データおよび、免疫後血清、正常血清をお客様へお送りいたします。 ※ ＥＬＩＳＡについてはこちら |
| 追加免疫または 細胞融合 |
ELISAの結果を参考に、お客様とご相談の上、追加免疫（最長４回まで）または細胞融合の予定を決定いたします。なお、この時点で必要な力価が得られなかった場合は、ここでモノクローナル抗体作製を中止することも可能です。 |
| Section 2 （約１ヶ月） |
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| 最終免疫 | 細胞融合実施の３日前に最終免疫を行います。この時、抗原の性状により尾静脈または腹腔内に投与いたします。 |
| 細胞融合 | 融合後、脾細胞の数に応じて、マウスの場合は１匹につき96 well-plate ４枚程度、ラットの場合は６枚程度に播種します。融合時に、全採血も行い、ハイブリドーマと一緒にお客様へお送りいたしますが、血清量につきましては保証 致しかねますので、ご了承ください。 |
| スクリーニング | 融合後、約10日間で初回アッセイが可能となります。ELISAにより培養上清をアッセイし、所定の発色が認められたウェル中の細胞を48 well-plateに移します。移植後の培養上清についてELISAにより特異性等を再確認後、測定データおよび陽性ウェル培養上清10種（約500 uL）をお客様へお送り致します。 |
| ウェルの選択 | お客様に、クローニングへ移行するウェル （５個以内） をご選択していただきます。この間、培養は継続しておりますので、 培養上清をお送りしてから１週間以内でのご選択をお願いしております。 この時点で、ご希望の陽性ウェルが得られなかった場合、ここでモノクローナル抗体作製を中止することも可能です。 |
| Section 3 （約１ヶ月半） |
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| 一次クローニング | 選択していただいたウェルについて、限界希釈法によるクローニングを実施いたします（96-well plate 各１枚）。クローニングから約２週間でELISAによるアッセイを行い、一枚のプレートにつき２個のウェルを選択し、一方については二次クローニングを実施、他方は少量の培地で培養した後、凍結保存いたします。この時のウェルの選択につきましては、お客様による選択または当社選択のどちらでも可能です。 |
| 二次クローニング | ご選択されたウェルにつきまして、限界希釈法による二度目のクローニングを実施いたします（96-well plate 各１枚）。 |
| ハイブリドーマ確立 | 二次クローニングから約２週間でELISAによるアッセイを行い、一枚のプレートにつき２個のウェルを選択し、拡大培養を行い、ハイブリドーマを確立します。その後、 約40 mLの培養上清、ハイブリドーマ凍結細胞（２チューブ）、モノクローナル抗体のサブクラスチェックの結果を納品いたします。 |
弊社にてモノクローナル抗体をご注文された場合
・血清評価用の正常血清、融合時血清を同封いたします。
・作製したハイブリドーマによるモノクローナル抗体のサブクラスの決定を無料で行います。
・引続き、モノクローナル抗体での腹水化等をご注文の場合、料金を割引いたします。
価格：
| 価格 （消費税別） | 納期 | |
| マウス (BALB/c) のケース | ||
| Section 1 | ￥25,000／匹 | 約2ヶ月 |
| Section 2 | ￥600,000 | 約1ヶ月 |
| Section 3 | ￥600,000 | 約1ヶ月半 |
| トータル価格（マウス５匹使用）…… ￥1,325,000 | ||
| ラット (SD , Wister) のケース | ||
| Section 1 | ￥45,000／匹 | 約2ヶ月 |
| Section 2 | ￥600,000 | 約1ヶ月 |
| Section 3 | ￥600,000 | 約1ヶ月半 |
| トータル価格（ラット３匹使用）…… ￥1,335,000 | ||
・上記の価格は、 モノクローナル抗体作製の基本価格となります。それ以外のお客様ご指定プロトコールにつきましては、ご相談ください。
・納期に関しましては、細胞の状態により上記よりも長くなる場合もありますので、ご了承下さい。
・ご請求は各セクションごとにおこないます。ただし、Section 2, 3においてお客様のご希望に添うようなクローンが得られず、モノクローナル抗体作製を中止とした場合、以下の様なご請求内容になります。
例1） セクション2の初回ELISAで、ご希望の陽性クローンが得られなかった場合
（Section 1 + Section 2 の半額）
例2） セクション3のクローニング時に、ご希望の陽性クローンが全て消失した場合
（Section 1 + Section 2 + Section 3 の半額）
オプション：
| 項目 | 価格 （消費税別） | 納期 |
| クローニング＋アッセイ | ￥50,000／1細胞 | 約3週間 |
| 培養上清作製 | ￥10,000／50ml | 約2週間 |
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